نام فارسی محصول : تست رشد سلول الایزا BrdU ، (رنگی)
Product name : Cell Proliferation ELISA, BrdU (colorimetric)
Model : 11647229001
Company : Roche
توضیحات کلی کیت تست رشد سلول BrdU
کیت تست رشد سلول BrdU یک روش ایمونواسی رنگی برای اندازه گیری تکثیر سلول است که بر اساس اندازه گیری ادغام BrdU در طی سنتز DNA است. این یک جایگزین غیر رادیواکتیو برای روش اندازه گیری ادغام [3H] تیمیدین است.
حساسیت تست رشد سلول BrdU
آنتی بادی کنژوگه با BrdU به BrdU و BrdU ادغام شده در DNA متصل می شود. برای اتصال به BrdU ادغام شده در DNA، DNA برچسب دار BrdU باید دئوکسید شود. آنتی بادی با هیچ جزء سلولی داخلی مانند تیمیدین، اوریدین یا DNA واکنش متقابل نمی دهد.
کاربرد کیت تست رشد سلول BrdU
کیت تست رشد سلول BrdU متعلق به نسل دوم و بهبود یافته کیت ها برای اندازه گیری سنتز DNA است. این یک جایگزین رنگی دقیق، سریع و ساده برای تعیین تکثیر سلول بر اساس اندازه گیری ادغام BrdU در طول سنتز DNA در سلول های در حال تکثیر (چرخه ای) است. بنابراین، کیت رشد سلول ELISA BrdU را می توان در بسیاری از سیستم های سلولی مختلف in vitro استفاده کرد. به عنوان مثال:
- تشخیص و کمیت سازی تکثیر سلول ناشی از عوامل رشد و سیتوکین ها
- تعیین اثرات مهاری یا تحریکی انواع مختلف ترکیبات بر تکثیر سلول در تحقیقات زیست محیطی و پزشکی، و در صنایع غذایی، آرایشی و دارویی
- اندازه گیری ایمونوژنیکیت لنفوسیت ها، تحریک شده توسط میتوژن ها یا آنتی ژن ها
- تجزیه و تحلیل حساسیت تومورهای سلول به داروهای مختلف سیتوستاتیک در تحقیقات پزشکی
- آزمایش سازگاری زیستی انواع مختلف داربست ها، مورد استفاده در مهندسی بافت استخوانی، برای رشد سلول های استخوان
| تعداد تست | برای ≤1000 تست کافی است |
| سطح کیفیت | 100 |
| سازنده/نام تجاری | Roche |
| دمای نگه داری | 2-8 درجه سانتی گراد |
1 عدد کیت شامل 6 جزء (لینک اطلاعات بیشتر)
غلظت کاری:
آنتی‌بادی کیت (Anti-BrdU-peroxidase) پس از بازسازی دارای غلظت 7.5 U/ml است و پس از رقیق‌سازی 0.075 U/ml است. به جای آنتی‌بادی کیت، می‌توانید از Anti-BrdU-Antibody، Fab fragments استفاده کنید. این آنتی‌بادی دو برابر غلظت دارد، بنابراین باید پس از بازسازی در 1 میلی لیتر با 1:200 رقیق شود.
محلول کاری:
محلول برچسب گذاری BrdU
BrdU labeling reagent را 1:100 با محیط کشت استریل رقیق کنید (غلظت حاصل: 100 μM BrdU).
برای یک MP 96-well، اگر سلول‌ها در 100 میکرولیتر/چاه (10 میکرولیتر/چاه) کشت داده شدند، 1 میلی لیتر محلول برچسب گذاری BrdU لازم است و اگر سلول‌ها در 200 میکرولیتر/چاه (20 میکرولیتر/چاه) کشت داده شدند، 2 میلی لیتر محلول برچسب گذاری BrdU لازم است.
محلول اصلی Anti-BrdU-peroxidase
Anti-BrdU-peroxidase را در 1.1 میلی لیتر آب دو بار تقطیر کنید و به مدت 10 دقیقه مخلوط کنید.
محلول کاری Anti-BrdU-peroxidase
محلول اصلی Anti-BrdU-peroxidase را 1:100 با محلول رقیق کننده آنتی بادی رقیق کنید. برای یک MP 96-well، 100 میکرولیتر محلول اصلی Anti-BrdU-peroxidase را در 10 میلی لیتر محلول رقیق کننده آنتی بادی رقیق کنید
محلول شستشو
Washing buffer concentrate را 1:10 با آب دوبار تقطیر رقیق کنید.
برای یک MP 96-well، 10 میلی لیتر Washing buffer concentrate را با 90 میلی لیتر آب دوبار تقطیر رقیق کنید.
شرایط نگهداری (محلول کاری):
محلول برچسب گذاری BrdU
محلول برچسب گذاری BrdU غیر رقیق شده (1000x): در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد به مدت چند ماه محافظت شده از نور نگهداری شود.
محلول برچسب گذاری BrdU رقیق شده: در دمای 2 تا 8 درجه سانتیگراد به مدت چند هفته پایدار است. در جای خنک و تاریک نگهداری شود. برای نگهداری طولانی مدت، توصیه می شود محلول شستشو را در دمای -15 تا -25 درجه سانتیگراد در قسمت های کوچک نگهداری کنید.
یادداشت بازسازی
محلول کاری آنتی بادی باید از فسفات بیس فسفات سدیم (PBS) حاوی 1% BSA (آلبومین سرم گاوی) با pH 7.4 باشد.
فقط برای تحقیقات علوم زیستی استفاده شود. برای استفاده در روش های تشخیصی نیست.
کیت تنها شامل اجزای زیر است
BrdU معرف
FixDenat آماده استفاده
آنتی بادی ضد BrdU-peroxidase
محلول رقیق کننده آنتی بادی آماده استفاده
محلول شستشوی PBS بافر 10x غلیظ شده
محلول سوبسترا TMB آماده استفاده
مزایا کیت تست رشد سلول BrdU:
تست رشد سلول ELISA، BrdU (رنگی) یک روش حساس و اختصاصی است که می تواند برای تشخیص سطوح پایین تکثیر سلول استفاده شود. همچنین، این روش نسبتاً سریع و آسان برای انجام است.
معایب کیت تست رشد سلول BrdU:
این آزمایش می تواند زمان بر و گران باشد. همچنین، این آزمایش ممکن است برای برخی از انواع سلول مناسب نباشد.
