نام فارسی محصول : رزین کروماتوگرافی نیکل
Product name : Nickel NTA Agarose Resin
Cat. No : 6BCL-NTANi-X
Company : abtbeads
رزین کروماتوگرافی نیکل آگارز تولید کمپانی آمریکایی Agarose Bead Technologies است که برای تخلیص و جداسازی پپتیدها و پروتئین های نوترکیب دارای توالی پلی هیستیدینی در تکنیک و روش های کروماتوگرافی استفاده می شود.
Nickel NTA Resin حاوی دانه های آگارز با اتصالات متقاطع زیاد است که با یک گروه شلاته کننده جفت شده است. این گروه شلاته کننده از قبل با نیکل باردار شده است، که به طور انتخابی پروتئین ها با گروه های هیستیدین را حفظ می کند. ظرفیت این رزین کروماتوگرافی نیکل ان تی ای بیش از 15 میلی گرم در میلی لیتر است و منجر به بازیابی پروتئین با مقدار بالا می شود. اندازه دانه کوچک کمک می کند تا فرآیند تخلیص نسبت به رزین های نیکل با دانه های بزرگتر کارآمد تر باشد.
Nickel NTA Resin از آگارز متقابل مشتق شده با اسید نیتریلوتری استیک (NTA) تشکیل شده است و خواص خوبی را در شرایط بومی یا دناتوره کننده ارائه می دهد. این رزین میتواند پروتئینهای دارای برچسب His را از انواع سیستمهای بیانی مانند باکولوویروس، مخمر، پستانداران و سلولهای باکتری بازیابی کند.
5 ML
10 ML
25 ML
50 ML
100 ML
| Spherical,Standard: ~ 50-150 µm | Bead Geometry & Size |
| Yes | Crosslinked |
| 6% | Agarose % |
| Nitrilotriacetic Acid (NTA) | Ligand |
| ≥ 50 mg/ ml gel | Static Binding Capacity |
| 15 % Ethanol of total volume | Antimicrobial Agent |
| 4-8˚C | Storage Temperature |
اصطلاح Ni-NTA (نیکل NTA) به یون نیکل 2 اشاره دارد که با اسید نیتریلوتری استیک (NTA) جفت شده است. سپس Ni-NTA را می توان با رزین آگارز یا دانه های مغناطیسی برای IMAC (کروماتوگرافی میل کلات فلزی بی حرکت) جفت کرد. این یک روش خالص سازی برای به دست آوردن پروتئین عملکردی با برچسب His است. اندازه دانه های رزین آگارز یا دانه های مغناطیسی استفاده شده بر سرعت جریان و بازده پروتئین تأثیر می گذارد.
Nickel-NTA Agarose Resin یک رزین تخصصی برای خالصسازی پروتئینهای دارای His-tag است که بر پایه آگاروز با لیگاند NTA و یونهای نیکل ساخته شده. این ترکیب باعث میشود رزین بتواند بهطور انتخابی به زنجیرههای هیستیدینی متصل شود و پروتئین هدف را از میان مجموعهای از پروتئینهای سلولی جدا کند. استفاده از این رزین یکی از رایجترین و مطمئنترین روشها برای تصفیه پروتئینهای نوترکیب است و تقریباً در تمام آزمایشگاههای بیوتکنولوژی، ژنتیک مولکولی و بیوشیمی کاربرد دارد.
ساختار پایدار NTA–Ni باعث میشود رزین در شرایط مختلف، چه در حالت Native و چه در حالت Denaturing، عملکرد قابل اعتمادی داشته باشد. حتی در حضور دناتورهکنندههایی مثل اوره یا گوانیدینیوم هم میتوان از این رزین استفاده کرد، بدون اینکه ظرفیت اتصال آن کاهش پیدا کند. این ویژگی باعث میشود برای پروتئینهایی که در فرم نامحلول (Inclusion Body) بیان شدهاند نیز مناسب باشد.
بررسی اجمالی رزین Nickel NTA :
کروماتوگرافی میل ترکیبی فلزات بی حرکت (IMAC) بر اساس برهمکنش بین باقی مانده های پروتئین سطحی خاص با کاتیون های فلزات واسطه است که کمپلکس های کلات را تشکیل می دهند. Nickel NTA Resin محصولاتی را برای کار در شرایط مختلف (بومی و دناتورهکننده، تراکمهای مختلف گروهها (دانههای فعال شده بالا و پایین)، کاتیونها (Ni2، Co2، Zn2 و Cu2) و فرمتها (رزینهای حجیم، ستونهای از پیش بستهبندی شده و کارتریج) ارائه میکند. دارای محصولاتی است که می تواند برای کارهای تحقیقاتی (جریان کم) یا تصفیه های صنعتی (High Flow – Rapid Run™) استفاده شود. ویژگی ها: این رزین از آگارز متقابل مشتق شده با اسید نیتریلوتری استیک (NTA) تشکیل شده است و خواص خوبی را ارائه می دهد که در حالت طبیعی یا دناتوره کننده کار می کند. این رزین میتواند پروتئینهای دارای برچسب His را از انواع سیستمهای بیانی مانند باکولوویروس، مخمر، پستانداران و سلولهای باکتری بازیابی کند.
در جریان خالصسازی با Nickel NTA Resin، لیزات سلولی یا نمونه پروتئینی روی رزین بارگذاری میشود و پس از اتصال انتخابی، با محلول شستوشوی حاوی مقدار کمی ایمیدازول، آلودگیها و پروتئینهای غیر اختصاصی حذف میشوند. در نهایت با استفاده از بافرهای الحاقی دارای ایمیدازول بالا یا تغییر pH، پروتئین هدف بهصورت خالص و آماده برای مراحل بعدی مانند SDS-PAGE، آنالیزهای بیوشیمیایی، مطالعات برهمکنش پروتئین–پروتئین یا حتی تولید آنتیبادی جدا میشود.
برای استفاده از این رزین معمولاً به یک ستون کروماتوگرافی ساده جریان ثقلی یا سیستمهای فشار پایین نیاز هست، اما امکان انجام خالصسازی بهصورت Batch نیز وجود دارد؛ در این حالت تنها داشتن سانتریفیوژ کافی است. همچنین وجود بافرهای تعادل، شستوشو و الحاق (عموماً بر پایه Tris یا PBS همراه با ایمیدازول) به همراه لولههای جمعآوری فراکشن، ابزارهای اصلی مورد نیاز هستند.
Nickel NTA Resin به دلیل عملکرد پایدار، ظرفیت اتصال بالا و سهولت استفاده، گزینهای ایدهآل برای آزمایشگاههایی است که به خالصسازی پروتئین با بازده و خلوص بالا نیاز دارند و میخواهند فرآیندی سریع، قابل تکرار و بدون پیچیدگی را تجربه کنند.
ویژگیها و مزایا:
- قدرت اتصال بالا برای پروتئینهای دارای 6×His و سایر His-tag ها
- خلوص نهایی عالی در هر دو شرایط Native و Denaturing
- دارای ظرفیت بایندینگ بالا و یکنواختی دانهبندی
- مقاومت مناسب در برابر دناتورهکنندهها مانند Urea و Guanidine-HCl
- مناسب برای انواع سیستمهای کروماتوگرافی جریان ثقلی، فشار کم (LPLC) و روش Batch
کاربردها Nickel NTA Resin
- خالصسازی پروتئینهای نوترکیب در E. coli، مخمر و سلولهای پستانداران
- آمادهسازی پروتئین برای SDS-PAGE، آنالیزهای بیوشیمیایی، مطالعات برهمکنش پروتئینی، تولید آنتیبادی و …
- تولید پروتئینهای تحقیقاتی یا صنعتی با خلوص بالا
